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《飼料中慶大霉素的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》征求意見

2023-12-25 09:40:56 來源：儀表網(wǎng) 閱讀量：10350

　　近日，由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)質(zhì)量標準與檢測技術(shù)研究所 、四川威爾檢測技術(shù)股份有限公司 、通威股份有限公司等單位起草，TC76(全國飼料工業(yè)標準化技術(shù)委員會)歸口的國家標準計劃《飼料中慶大霉素的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》征求意見稿已編制完成，現(xiàn)公開征求意見。
 
　　慶大霉素是廣譜抗生素，對葡萄球菌、鏈球菌、肺炎球菌、炭疸桿菌等革蘭氏陽性菌和大腸桿菌、沙門氏菌、綠膿桿菌、巴氏桿菌等革蘭氏陰性菌均有良好抑殺作用，對結(jié)核桿菌的殺菌力也較強，是目前我國畜牧業(yè)和水產(chǎn)業(yè)中常用的獸藥之一，主要用于敏感菌引起的消化道、呼吸道、泌尿生殖系統(tǒng)感染及敗血癥等。對豬牛羊的治療，如肺炎、鼻炎等，可抑制引起呼吸道感染的細菌的生長，減輕炎癥癥狀，并幫助恢復(fù)呼吸系統(tǒng)的正常功能，修復(fù)腸道功能，減輕腹瀉癥狀，并促進消化道健康。
 
　　由于慶大霉素的毒性，飼料中添加的慶大霉素被動物機體吸收，產(chǎn)生動物蓄積，使人食用含有慶大霉素的動物性食品后在人體內(nèi)產(chǎn)生耐藥性和一定的毒性。因此，飼料中慶大霉素的殘留和抗生素污染已成為國內(nèi)外的關(guān)注熱點之一。農(nóng)業(yè)部出臺了一系列公告禁止抗生素在飼料中的使用，并于2019年發(fā)布194號公告，規(guī)定自2020年起，飼料生產(chǎn)企業(yè)停止生產(chǎn)含有促生長類藥物飼料添加劑的商品飼料，隨著抗生素在飼料中的禁用，慶大霉素也正式在飼料中禁用。然而慶大霉素在飼料中非法添加和外源污染問題時有發(fā)生，對飼料工業(yè)發(fā)展、人類健康和環(huán)境安全帶來大量的負面影響。因此，制訂飼料中慶大霉素的檢測標準具有重要意義。
 
　　本文件按照GB/T 1.1-2020《標準化工作導(dǎo)則 第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件起草單位：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)質(zhì)量標準與檢測技術(shù)研究所、四川威爾檢測技術(shù)股份有限公司、通威農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司。
 
　　本文件描述了飼料中慶大霉素的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定方法。本文件適用于配合飼料、濃縮飼料、精料補充料和添加劑預(yù)混合飼料中慶大霉素的測定。本文件慶大霉素的檢出限為50μg/kg，定量限為100μg/kg。
 
　　原理：
 
　　試樣中的慶大霉素用5%三氯乙酸溶液提取、混合型陽離子交換固相萃取柱凈化，液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀測定，基質(zhì)匹配曲線校準，外標法定量。
 
　　儀器設(shè)備：
 
　　1.液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀：配電噴霧離子源(ESI)。
 
　　2.分析天平：精度為0.1mg 和0.01mg。
 
　　3.離心機：轉(zhuǎn)速不低于8000r/min。
 
　　4.超聲波清洗儀。
 
　　5.固相萃取裝置。
 
　　6.氮吹儀。
 
　　樣品：
 
　　按照GB/T 20195規(guī)定制備試樣，至少200g，粉碎使其全部過0.425mm試驗篩，混合均勻，裝入密閉容器中，備用。選取類型相同，均勻一致、且在待測物保留時間處，儀器響應(yīng)值小于方法定量限30%的飼料樣品，作為空白樣品。
 
　　液相色譜參考條件如下：
 
　　a)色譜柱：C18色譜柱，柱長100mm，內(nèi)徑2.1mm，粒徑1.7μm，或性能相當(dāng)者；
 
　　b)柱溫：30 ℃；
 
　　c)流速：0.4mL/min；
 
　　d)進樣量：5L；
 
　　e)流動相：A 相為0.1%甲酸溶液(5.7)，B 相為 0.1%甲酸乙腈溶液(5.8)。
 
　　質(zhì)譜參考條件如下：
 
　　a) 電離方式：電噴霧電離，正離子模式(ESI+)；
 
　　b) 檢測方式：多反應(yīng)監(jiān)測(MRM)；
 
　　c) 霧化氣、干燥氣為高純氮氣，碰撞氣為高純氬氣或其他合適氣體；
 
　　d) 噴霧電壓、碰撞能量等參數(shù)應(yīng)優(yōu)化至最優(yōu)靈敏度。
 
　　定量：
 
　　以基質(zhì)匹配標準系列溶液中待測組分的質(zhì)量濃度為橫坐標，色譜峰面積為縱坐標，繪制標準曲線，標準曲線的相關(guān)系數(shù)應(yīng)不低于0.99。試樣溶液與標準溶液中待測物的響應(yīng)值均應(yīng)在儀器檢測的線性范圍內(nèi)，如超出線性范圍，應(yīng)重新測定。單點校準定量時，試樣溶液中待測組分質(zhì)量濃度與標準溶液質(zhì)量濃度相差不超過30%。
 
　　精密度：
 
　　在重復(fù)性條件下，兩次獨立測定結(jié)果與其算術(shù)平均值的絕對差值不大于該算術(shù)平均值的20%。
 
　　更多詳情請見附件。

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